Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸(phosphatidylserine,簡稱PS)的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒。可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光 檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。
檢測原理
凋亡早期,細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸(PS)會從膜內(nèi)翻到膜外,這是凋亡的一個典型特征,細(xì)胞凋亡處于早期階段時(shí),僅有PS外翻,而細(xì)胞膜仍然完整,隨著凋亡進(jìn)程的推移,細(xì)胞除了PS外翻以外,細(xì)胞膜通透性會改變,可以簡單的理解成凋亡后期,細(xì)胞膜有穿孔的現(xiàn)象。
Annexin V凋亡檢測試劑盒一般包含3個組分:兩個染料和一個為Annexin V標(biāo)記提供鈣離子環(huán)境的Binding Buffer。Annexin V本質(zhì)是一個在鈣離子環(huán)境下,能夠與磷脂酰絲氨酸高度特異性結(jié)合的膜聯(lián)蛋白,通過在該蛋白上標(biāo)記的熒光基團(tuán),來標(biāo)記凋亡細(xì)胞,然后再搭配只能夠進(jìn)入受損細(xì)胞膜的核酸染料,就可以達(dá)到區(qū)分各階段細(xì)胞的目的了。
細(xì)胞分為三類:一是無PS外翻,也沒有細(xì)胞膜破裂的健康細(xì)胞(兩個染料都染不上),二是處于早期凋亡,有PS外翻但是細(xì)胞膜完好的細(xì)胞(可以染上Annexin V-FITC,不能染上PI),三是處于晚期凋亡階段,既存在PS外翻,也存在細(xì)胞膜破裂的晚期凋亡細(xì)胞(兩種染料均可染上)。染完色后通過流式細(xì)胞儀,就能夠?qū)?xì)胞群體進(jìn)行定量和分析了。
Bioss Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒介紹
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
文獻(xiàn)引用次數(shù) |
Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit |
20T/50T/100T |
16篇 |
Bioss自主研發(fā)產(chǎn)品,染色效果優(yōu)于國際高價(jià)格品牌!
調(diào)亡細(xì)胞群分群清晰,且細(xì)胞群集中!
不同檢測方案,信號更強(qiáng)更靈敏!
操作簡便,省時(shí)又省力,加入PI 后5min可直接上機(jī)檢測!
BA00101檢測數(shù)據(jù)
A. 流式細(xì)胞儀分析:
AF488最大激發(fā)波長為488nm,最大發(fā)射波長519nm;PI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長為 535nm, 最大發(fā)射波長為615nm。用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制散點(diǎn)圖,AF488為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。典型實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞可以分成三個亞群,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的自發(fā)熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色及紅色熒光雙重染色。
B. 熒光顯微鏡分析:
懸浮細(xì)胞:滴一滴用 AnnexinV-AF488/PI 雙染的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞。
貼壁細(xì)胞:可直接用蓋玻片培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
在熒光顯微鏡下用雙色濾光片觀察。早期凋亡細(xì)胞僅有綠色熒光信號,晚期凋亡細(xì)胞有綠色及紅色熒光雙重染色。
Annexin V單染(左)、PI單染(中)、Annexin V/PI雙染(右)
Bioss產(chǎn)品與國際品牌檢測結(jié)果對比示例
Protocol:
Jurkat 細(xì)胞生長至對數(shù)生長期時(shí),分別經(jīng)過紫外誘導(dǎo)0秒、15秒、30秒后,繼續(xù)培養(yǎng)4h后加入Annexin V-FITC / PI檢測。
Result:
Bioss
e品牌
k品牌
其他標(biāo)記細(xì)胞凋亡檢測試劑盒 |
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產(chǎn)品貨號 |
英文名稱 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
BA00102 |
Annexin V-AF488 Apoptosis Detection Kit |
20T/50T/100T |
BA00103 |
Annexin V-AF647 Apoptosis Detection Kit |
20T/50T/100T |
BA00206 |
Annexin V-eGFP Apoptosis assay Kit |
20T/50T/100T |
BA00207 |
Annexin V PE/7-AAD Apoptosis assay Kit |
20T/50T/100T |